嘌呤类药物毒性分析

　　不同癌症的治疗方式也不同，以消化道癌症为例，最优先考虑的治疗方式是手术切除，之后再合并化学治疗或放线线治疗。对于发现肿瘤时已经转移或是无法手术摘除的病患，只有依赖化学治疗为主的几种治疗方式。众所周知的是，化学治疗不但效果有限，产生的副作用也非常大。有趣的是，即使是罹患同样的癌症，且其肿瘤组织在病理学上分期也相似的一群病患，治疗的效果却有可能大不相同。有些病患会因为化疗失败而死亡；有些病患会因为副作用太强而被迫停药；也有一些病患在化疗之后，不但没有副作用，而且成功抑制肿瘤的生长。这些病患之间当然存在许多个体差异，例如年纪、性别、种族、饮食习惯、器官功能、疾病史和生活环境等。然而，长久以来治疗癌症的策略中，都缺乏了解每个人基因组上的不同对治疗效果所产生的影响。
　　基因组的不同主要来自染色体不同位点上的DNA序列差异，这些差异可以分为突变、不定数目重复序列及单核苷酸多态性。对人体而言，这些基因组的差异造成每个人在各方面的不同，如长相、声音、身高和体重等，甚至也决定了是否对海鲜或货花生过敏，或时候容易罹患癌症等。因此，理论上，基因组的差异也会导致个体多药物的反应不同。然而，自化疗药物问世以来，大部分癌症病患接受化疗的时候，却未依据基因组的差异调整适合的治疗剂量，最主要的原因是医学界过去对人类基因组的了解太少，没有适当的标记可以依循。近年来，由于人类基因组解码完成，大大增加了研究人员对人类基因组的了解，因此，有越来越多的学者投入此全新的领域。许多研究已经将这些基因组差异和临床化学治疗用药的效果做比较。
　　巯基嘌呤甲基转移酶(TPMT)是一种专门催化芳香族和杂环化合物的巯基甲基化反应的胞内酶，与临床上使用的巯基嘌呤类药物的代谢有重要关系。而巯基嘌呤类药物在临床上已使用多年，常用的药物为6-巯基嘌呤(MP)、6-硫鸟嘌呤(TG)和咪唑硫嘌呤(AT)，主要用于白血病和肿瘤的化疗、器官移植受者的免疫抑制治疗以及自身免疫性疾病的治疗。
　　在TPMT缺陷的病人中发现的第一种突变(称为TPMT2)是第80位密码子改变，即发生了G238→C颠换，由此导致丙氨酸80→脯氨酸(Alu80→Pro)，使TPMT活性上百倍地下降。据推测产生这种现象的原因是由于Alu80→Pro后，引起了TPMT二级结构的改变，产生了另一种折迭形式，改变了酶蛋白的稳定性，致使酶活性丧失。发现的另一种突变(称为TPMT3)是在TPMT的ORF出现了两个核苷酸的转换，即G460→A和A719→G，导致相应的氨基酸由丙氨酸154→苏氨酸和酪氨酸240→半胱氨酸。根据研究发现，产生这种突变后可使细胞内TPMT蛋白的含量下降，可比野生型低400倍，从而导致该酶缺陷。
　　临床上广为使用的巯基嘌呤类药物主要有6-巯基嘌呤(MP)、6-硫鸟嘌呤(TG)和咪唑硫嘌呤(AG)。MP用于治疗急性淋巴母细胞白血病(ALL)已40多年，至今仍是ALL治疗方案中不可缺少的药物。而AT则已成为免疫抑制治疗的三联药物之一，已广泛用于肾移植病人。近来报道还可用于治疗自身免疫性肝炎，且效果良好。巯基嘌呤类药物在体内的代谢主要有两条途径，一是在TPMT的催化下使硫基甲基化，二是在黄嘌呤氧化酶的作用下氧化成硫尿酸。由于造血组织中缺乏黄嘌呤氧化酶，该组织中的嘌呤类药物主要靠TPMT催化分解，因而TPMT缺陷的病人，如果使用了常规剂量的MP、AT和TG时，则会引起巯基嘌呤类药物在体内堆积，而且主要影响造血系统，轻者引起中毒和影响治疗效果，重者可致死亡。虽然测定RBC中的TPMT活性可诊断TPMT缺陷，但由于肿瘤病人和器官移植受者接受同种异体输血后，干扰了TPMT活性的检测结果。故对TPMT缺陷者最好采用基因诊断。通过建立PCR分析法，可测定>80%的TPMT缺陷的基因，并有助于提高基因诊断水平，为将来的基因治疗奠定基础。中国是发展中国家，由于经济的制约，TPMT缺陷的发生频率可能还会高一些，因而特别有必要开展这方面的检查和研究，更好地造福于患者。